对于所得的DNA解链曲线来说，所指温度通常是所测定的吸收值（A260)处的温度。如果加热DNA至温度T，再冷却到25℃，

对于所得的DNA解链曲线来说，所指温度通常是所测定的吸收值(A₂₆₀)处的温度。如果加热DNA至温度T，再冷却到25℃，然后测定25℃时的A₂₆₀，并相对于T作曲线，可得到另一种解链曲线。这种曲线称为不可逆曲线或i-曲线，因为只有当DNA分子发生不可逆变化时也就是DNA保持单链状时，A₂₆₀才会增加。就图2-3-16所示的解链曲线，仔细画出关于细菌DNA的随机断裂片段、完整的噬菌体DNA以及含有几处磷酸二酯键断裂的噬菌体DNA的假想i-曲线。