两个杆菌基因a和b基因转化实验数据如下表。根据转化分析中连锁的定义，指出这两个基因是否连锁？如果连锁，二者相距多远？实验供体DNA 受体DNA 重组子类型个体数 A a+b- a-b- a+b- 232 a-b+ a-b+ 341 a+b+ 7 B a+b+ a-b- a+b- 130 a-b+ 96 a+b+ 247

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第1题

两个杆菌基因和基因转化实验的数据如下表：

实验	供体DNA	受体DNA	转化重组子类型		个体数

			a	b
A	a⁺b^- a^-b⁺	a^-b^-	+ -	- +	232 341

B	a⁺b⁺	a^-b^-	+ - +	- + +	7 130 96 247

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第2题

某研究者打算研究两个袋鼠基因A和B在大肠杆菌中的表达。在对基因A进行的实验中，用EcoRI部分酶解袋鼠DNA，将片段插入质粒pBR322，转化到A基因缺失的大肠杆菌突变体中，并找一种需要A基因活性的选择标记。对基因B的实验是，用反转录酶合成袋鼠肝细胞mRNA，已知肝细胞含有可合成大量酶B的DNA拷贝。然后将这些DNA拷贝插入pBR322，转化到不能合成有功能B酶的大肠杆菌突变体中，将B活性作为选择标记。

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第3题

两株基因型分别为A⁺B^-和A^-B⁺的大肠杆菌(E.coli)混合培养后出现了野生型菌株，你如何证明原养型的出现是接合作用，转化作用或转导作用的结果。

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第4题

假设你需要将一段cDNA克隆到表达载体中并转化到大肠杆菌中。cDNA的两端和载体上均有BamHⅠ的酶切位点，你需要用BamHⅠ切割eDNA和载体然后将它们连接在一起。下面是实验方法要求的具体步骤：a．用BamHⅠ处理载体DNA，然后用碱性磷酸酶去除5'端的磷酸基；b．用BamHⅠ处理cDNA，然后与步骤a中得到的载体DNA混合，加入DNA聚合酶，在适当的条件下使cDNA与载体连接；C．将步骤b的产物转入大肠杆菌感受态细胞中，培养后均匀涂在含有抗生素的琼脂培养皿上。

因为表达载体中含有抗性基因，能表达抵制抗生素的酶，所以只有含有载体的大肠杆菌才可以在含有抗生素的培养皿上生长，而未被转化的细菌则因受到抗生素的抑制而死掉。

你还参照实验手册做了下面四组对照：

对照一、在含有抗生素的培养皿上面涂布未被转化的(即不含有载体的)大肠杆菌感受态细胞(cells alone)。

对照二、用未被酶切的载体直接转化大肠杆菌感受态细胞，将产物涂布在含有抗生素的培养皿上面(vector alone)。

对照三、用BamHI酶切载体DNA后，不用碱性磷酸酶处理，不需要cDNA，直接加入DNA聚合酶，然后转化、涂板(Omit phosphatase，omit eDNA)。

对照四、除使用碱性磷酸酶外，其它与对照三相同(Omit cDNA)。

你一共做了三次实验，在第一次中所有的平板中都长出很多细菌。在第二次实验中所有的平板中都没有长细菌。在第三次实验中你得到了较好的结果，转化成功，具体克隆数见下表：

Preparation of Sample		NO.of Colonies
		NO.of Colonies
		1	2	3
Control 1	Ceils alone	TMTC	0	0
Control 2	Uneut vector	TMTC	0	＞1000
Control 3	Omit phosphatase，omit cDNA	TMTC	0	435
Control 4	Omit CDNA	TMTC	0	25
Experimental sample		TMTC	0	34
TMTC=too many to count