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[主观题]

E.coli OH157生长得特别快。在正常(较差的环境)条件下,这些菌60~70min后分裂表明复制和细胞的分裂是连续的过

E.coli OH157生长得特别快。在正常(较差的环境)条件下,这些菌60~70min后分裂表明复制和细胞的分裂是连续的过程,一个仅在另一个完成后才起始。假如有机会生长在一个多汁暖和的牛肉饼上,加倍的时间接近20min,这比复制过程所需的标准时间快1倍。请解释原因。详细描述原核生物中DNA的复制过程(如结构和功能特征及一系列过程)。涉及多基因组拷贝的复制却没有发生碰撞,其复制机制如何?

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第1题

图Q2.2中的DNA片段两端为双链,中间为单链,上面一条链的极性已标出。 图Q2.2一个具有单链缺口的双链DNA分

图Q2.2中的DNA片段两端为双链,中间为单链,上面一条链的极性已标出。

  

  图Q2.2一个具有单链缺口的双链DNA分子

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第2题

除了聚合作用外,DNA聚合酶Ⅰ还具有3'→5'校正核酸外切酶的活性,在把错配碱基从新合成DNA链末端切去的

校正过程中发挥作用。为了鉴定这种活性,你制备了人工合成的poly(A)链和poly(T)链作为底物,其中poly(T)链上含一段32P标记的dT残基,同时其3'端还连了几个3H标记的dC残基,如图Q2.3所示。分别统计:在没有任何dTTP存在,DNA不可能合成以及有dTTP存在,DNA可以合成的两种情况下,标记dT和dC残基的丢失,结果如图Q2.4所示。

  

  图Q2.3研究大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ校正功能的人工底物黑体字母表示被放射性标记的核苷酸

  

  图Q2.4 DNA聚合酶Ⅰ在不含dTTP(a)和含有dTTP(b)时的校正功能

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第3题

大肠杆菌的dnaB基因编码一个在复制叉上可将DNA解折叠的解旋酶(DnaB)。已利用如图Q2.5所示的人工底物对它的特

性进行了研究。实验方法是在多种条件下培养底物,然后把样品进行琼脂糖凝胶电泳。如果短单链DNA与长的DNA已退火结合在一起,那么泳动速率就会快些,但如果它已解折叠且已变性,则泳动速率就会慢些。把短链进行放射性标记就可选择性地跟踪它的迁移,然后用放射自显影检查它的位置。图Q2.6所示为几个实验的结果,底物1没有尾巴的杂交体,不被DnaB解折叠(图Q2.6,第1泳道、第2泳道);但是有尾的底物和DnaB、ATP在37℃下温育同样能释放出大量解折叠的小片段(第6泳道、第10泳道)。对于底物3,只有3'部分片段是解折叠的(第10泳道),所有的解折叠产物都绝对依赖于ATP的水解。加DNA单链结合蛋白(SSB)可在一定程度上加强这种解折叠(比较一下第5泳道、第9泳道与第10泳道)。有趣的是,SSB必须在DnaB加后3min加入,否则会抑制解折叠。

  

  图Q2.5用来检测DnaB的底物

  

  图Q2.6几个检测DnaB解折叠实验的结果,只有单链片段被放射性标记,它们各自的位置已在图中标明

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第4题

一个研究小组正在利用一个环状双链DNA作为一种动物病毒的基因组来研究它的生命周期。实验的第一步是要确定复

制区的位置,同时决定复制是沿起点的单向还是双向进行。为此目的,先分离出复制中的分子,用限制酶在一个位点切割病毒基因组使其成为一个线性分子,然后用电镜来观察所得到的分子。图Q2.7是所观察到的一些分子。(注意:电镜下不可能区分DNA分子的两端。)根据这一结果,如何判断:

  

  图Q2.7 从一个起点开始的双向复制

  (1)复制起点是单个还是多个?

  (2)复制是单向还是双向?

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第5题

1.病毒ΦX174及M13的遗传物质都是______。

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第6题

2.AIDS病毒的遗传物质是______。

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第7题

3.X射线分析证明一个完整的DNA螺旋延伸长度为______。

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第8题

4.______键负责维持A-T间(或G-C间)的亲和力。

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第9题

5.天然存在的DNA分子形式为右手______型螺旋。

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第10题

1.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是:肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主

要的论点证据是(  )。

  A.从被感染的生物体内重新分离得到DNA作为疾病的致病剂

  B.DNA突变导致毒性丧失

  C.生物体吸收的外源DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能

  D.DNA是不能在生物体间转移的,因此它一定是一种非常保守的分子

  E.真核生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代

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