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噬菌粒载体是由 的部分序列和质粒构建而成
A.单链噬菌体
B.λ噬菌体
C.BAC
D.YAC
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第1题
A. 黏粒载体
B. 人工染色体
C. 质粒载体
D. 噬菌体载体
E. 病毒载体
第3题
A. 是由λ噬菌体与质粒DNA重组的载体
B. 既有质粒的特性,又有噬菌体DNA的特性(如可体外包装)
C. 可插入大片段的外源DNA片段
D. 可像YAC载体那样构建大片段的基因组文库
第4题
A. 是由λ噬菌体与质粒DNA重组的载体
B. 既有质粒的特性,又有噬菌体DNA的特性(如可体外包装)
C. 可插入大片段的外源DNA片段
D. 可像YAC载体那样构建大片段的基因组文库
第10题
你在一种高效的克隆载体λYES(酵母一大肠杆菌中穿梭)中构建了一个cDNA文库,这种载体是由细菌噬菌体λ基因和一种可在大肠杆菌和酵母中复制的质粒重组而成,它结合了病毒和质粒克隆载体的优点。cDNA可以插入到载体的质粒部分,这样就可以在体外被包装进一个病毒衣壳,包装后的载体感染E.coli比质粒自身更有效,一旦进入E.coli,在λYES中的质粒序列可诱导脱离λ基因组进行重组并可自我复制,这就使cDNA在质粒上与λ分离,这就有利于以后的操作。
为了使克隆效率最大,载体和cDNA均用特殊的方法加以制备,在载体DNA单一独特的XhoI位点切割(5'-CTCGAG)后在dTTP存在下与DNA多聚酶一起孵育,一个制备好的钝端cDNA与一个双链寡核苷酸接头连接,这个接头由两个寡核苷酸5'-CGAGATTTACC和5'-GGTAAATC组成,其5'-末端均有磷酸基团,然后DNA和cDNA混匀并进行连接。这个方案证实非常有效,用2μg载体和0.1mg cDNA,你可以得到4×107重组分子组成的文库。
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