将人类胚胎成纤维细胞进行培养时

培养胚胎干细胞所使用的饲养层为(  )

  A．hela细胞  B．人肾细胞  C．成纤维细胞

  D．肌肉细胞  E．性腺细胞

从胎儿肺得到的成纤维细胞可在体外条件下传50代，而从成人肺得到的成纤维细胞可在体外条件下传20代，这主要是因为______。

  A．胎儿的肺成纤维细胞没有完全分化

  B．体内细胞生长环境在胎儿和成人不同

  C．成人的肺成纤维细胞受到凋亡因子的影响

  D．体外培养细胞的增殖能力是受供体年龄限制的

A.成人的成纤维细胞只能传代20次

B.小老鼠的成纤维细胞最高传代30次

C.乌龟的成纤维细胞最高传代90次

D.胎儿的成纤维细胞可以传代无数次

小鼠胚胎细胞成纤维细胞细胞系10T1/2是一个非常稳定的细胞系，它的细胞以及细胞的行为看起来都与正常成纤维细胞相似。如果这些细胞在含5'-氮化胞苷的培养基中培养24小时，随后当它们长到很高的密度时，用5'-Azac处理会降低DNA甲基化的正常水平，使原先没有活性的基因活化为开放基因。它们将分化为软骨细胞、肥大细胞和肌肉细胞。如果这些细胞用5'-AzaC处理过后，在低细胞浓度下生长，它们保持原有成纤维细胞的特性，但是当生长许多代后，细胞达到高密度时又会分化。10T1/2细胞如果不曾用5'-氮化胞苷处理过，无论细胞浓度如何都不会引起分化。

  当处理过的细胞分化时，大约25%的细胞转变为肌肉细胞(肌原纤维)，肌原细胞形成的高频率导致一种假说的建立，一个独立的主调控基因，它正常情况下由于甲基化受到抑制，它可以启动完整的转化。估计这个基因在用5'-氮化胞苷处理前是处于关闭状态，而在诱导的肌原细胞中呈开放状态。如果这个设想是真的，在用5'-氮化胞苷处理后的mRNA的cDNA拷贝中应能找到与这个用5'-AzaC处理后就开始启动的基因有关的序列。对策是应用一套放射性探针从正常肌原细胞(这种细胞按照你的设想也能表达这个基因)获得的cDNA文库中挑选可能的cDNA克隆。应准备三种放射性探针：

  探针1：从5'-氮化胞苷诱导的肌原细胞中分离RNA，制备含放射性的cDNA探针。

  探针2：用5'-AzaC处理的肌原细胞中的有放射性的cDNA与未经处理的10T1/2细胞中的RNA进行杂交，除去所有的RNA和DNA杂合体。

  探针3：从正常的肌原细胞中分离RNA，制备放射性DNA探针，然后与未经处理的10T1/2细胞中的RNA杂交，除去所有的RNA和DNA杂合体。

  第一个探针同cDNA文库中的大多数克隆发生了杂交，但是这些克隆中只有约1%的克隆与探针2或探针3进行杂交。总之，有四种独特的杂交模式(表13-3-54)。

  

表13-3-54
Class	Probe 1	Probe 2	Probe 3
A B C D	+ + + +	— — + +	— + — +

试述Wolman's病的症候和病因。将患者的皮肤的成纤维细胞进行培养，HMG-CoA的活性是变高，还是变低?在培养基中LDL-受体的数量是增还是减?

将( )引人体外培养的成纤维细胞，这些成纤维细胞没有分化成肌细胞，但是将( )引入到体外培养的成纤维细胞中后，肌细胞的分化便开始了。说明( )还能改变一些已经分化的非肌细胞的发育。

A、30

B、40

C、50

D、60