小量制备质粒DNA，用质粒中特定的酶切发现切割不动，试分析可能原因及克服方法？

用限制性内切酶进行DNA切割，有时会出现拖尾现象，即酶切不充分，可能的原因有哪些?

限制性内切核酸酶在DNA中的识别/切割位点的二级/三级结构也影响酶切效率。一般来说，完全切割质粒或病毒DNA，要比切割线状DNA需要更多的酶，最高的需要20倍。

A.限制性内切酶在特定的位置上切割质粒和供体DNA分子

B.载体DNA和供体DNA在连接酶的作用下末端相连形成重组DNA

C.除质粒外，入噬菌体可作为重组DNA的载体

D.筛选含重组DNA的细菌通常可根据载体对抗生素的抗性来进行

E.以质粒为载体构建的重组DNA分子引入宿主细胞时需与宿主DNA结合

下列对DNA克隆操作的描述哪一项是错误的

A．限制性内切酶在特定的位置上切割质粒和供体DNA分子

B．载体DNA和供体DNA在连接酶的作用下末端相连形成重组DNA

C．除质粒外，λ噬菌体可作为重组 DNA的载体

D．筛选含重组DNA的细菌通常可根据载体对抗生素的抗性来进行

E．以质粒为载体构建的重组DNA分子引入宿主细胞时需与宿主 DNA结合

下列对DNA克隆操作的描述哪一项是错误的

A．限制性内切酶在特定的位置上切割质粒和供体DNA分子

B．载体DNA和供体DNA在连接酶的作用下末端相连形成重组1DNA

C．除质粒外，λ噬菌体可作为重组DNA的载体

D．筛选含重组DNA的细菌通常可根据载体对抗生素的抗性来进行

E．以质粒为载体构建的重组DNA分子引入宿主细胞时需与宿主DNA结合

A. 基因工程的核心就是构建重组DNA分子

B. 质粒pZHZ2上存在RNA聚合酶结合的位点

C. 重组质粒pZHZ2只能被限制酶G、H切开

D. 质粒pZHZ1、pZHZ2复制时一定会用到DNA聚合酶